细胞色素P450酶催化糖肽分子内苯酚偶联反应机制研究获进展----澳门赌场

澳门赌场

加快打造原始创新策源地，加快突破关键核心技术，努力抢占科技制高点，为把我国建设成为世界科技强国作出新的更大的贡献。

——习近平总书记在致澳门赌场建院70周年贺信中作出的“两加快一努力”重要指示要求

面向世界科技前沿、面向经济主战场、面向国家重大需求、面向人民生命健康，率先实现科学技术跨越发展，率先建成国家创新人才高地，率先建成国家高水平科技智库，率先建设国际一流科研机构。

——澳门赌场办院方针

首页 > 科研进展

细胞色素P450酶催化糖肽分子内苯酚偶联反应机制研究获进展

2024-06-14 南海海洋研究所

【字体：大中小】

语音播报

近日，澳门赌场南海海洋研究所研究员张长生团队和厦门大学教授王斌举团队合作，在细胞色素P450酶催化糖肽分子内苯酚偶联反应的机制研究中取得进展。相关研究成果以Discovery and Biosynthesis of Cihanmycins Reveal Cytochrome P450-Catalyzed Intramolecular C?O Phenol Coupling Reactions为题，发表在《美国化学会志》（JACS）上。

在化学生物学领域，细胞色素P450酶因独特、多样的催化能力而备受关注。P450酶催化的分子内C?O和C?C苯酚偶联反应在天然产物生物合成中扮演着关键角色，广泛存在于糖肽类抗生素中。虽然糖肽类抗生素中多个催化分子内苯酚偶联反应P450酶的功能和晶体结构相继被解析，但底物复合物结构的缺失导致该类反应的催化机制是未解之谜。

该研究在放线菌Amycolatopsis cihanbeyliensis DSM 45679中发现了C?O连接的新型双环糖肽类化合物cihanmycins（CHMs）。CHM A (1)的结构通过X-ray单晶衍射确定为双环糖肽，包含肉桂酰基团和两个稀有的D-阿拉伯呋喃糖。研究基于生物信息学分析和异源表达实验，在DSM 45679的基因组中定位了CHM的基因簇，并通过体内基因敲除和体外生化实验证实了3个P450酶的功能，也就是Cih26负责肉桂酰基团的环氧化和羟化，Cih32负责三个氨基酸的羟化，Cih33及其同源蛋白DmlH和EpcH催化分子内C?O苯酚偶联反应形成CHM的双环骨架。

为揭示Cih33及其同源蛋白催化C?O苯酚偶联反应的机制，该团队开展了晶体学研究并解析了DmlH和DmlH?7复合物的晶体结构，揭开了分子内C?O苯酚偶联P450酶与大环肽结合模式的神秘面纱。同时，单环底物7的柔性结构使其NMR信号裂分复杂，难以解析结构，而DmlH?7的结构获取提供了通过复合物晶体鉴定小分子结构的案例。底物7与DmlH的辅因子血红素平面之间有一个水分子，可能在苯酚偶联反应的攫氢过程中起到关键作用。为验证这一推测，该研究开展了分子动力学模拟和量子力学/分子力学计算，揭示了DmlH催化分子内苯酚偶联反应由水介导的双自由基机制，提出了水分子在双自由基苯酚偶联反应中的重要作用。

此外，基于生信分析，科研人员在数据库中挖掘到81个含有Cih33同源蛋白的肽类基因簇。该团队对这些基因簇的P450酶进行系统发育分析，发现催化分子内苯酚偶联反应的Cih33/DmlH/EpcH和糖肽类抗生素的P450酶均聚集在同一分支，表明该分支中的其他P450酶可能具有相似的功能和机制，而编码这些P450酶的基因簇有望产生新颖的双环肽类化合物。

该研究证实了双环糖肽类化合物CHM生物合成中3个P450酶的功能，并利用酶学和计算化学等方法揭示了DmlH催化分子内苯酚偶联反应由水介导的双自由基机制，为探讨P450酶催化的分子内苯酚偶联反应提供了新视角，并为发现和开发更多新颖的双环肽类化合物奠定了研究基础，为抗生素研发奠定了物质基础。

研究工作得国家重点研发计划“合成生物学”重点专项、国家自然科学基金重大项目、澳门赌场王宽诚率先人才计划、广东省自然科学基金等的支持。

论文链接

CHM生物合成中3个P450酶的功能

近日，澳门赌场南海海洋研究所研究员张长生团队和厦门大学教授王斌举团队合作，在细胞色素P450酶催化糖肽分子内苯酚偶联反应的机制研究中取得进展。相关研究成果以Discovery and Biosynthesis of Cihanmycins Reveal Cytochrome P450-Catalyzed Intramolecular C?O Phenol Coupling Reactions为题，发表在《美国化学会志》（JACS）上。在化学生物学领域，细胞色素P450酶因独特、多样的催化能力而备受关注。P450酶催化的分子内C?O和C?C苯酚偶联反应在天然产物生物合成中扮演着关键角色，广泛存在于糖肽类抗生素中。虽然糖肽类抗生素中多个催化分子内苯酚偶联反应P450酶的功能和晶体结构相继被解析，但底物复合物结构的缺失导致该类反应的催化机制是未解之谜。该研究在放线菌Amycolatopsis cihanbeyliensis DSM 45679中发现了C?O连接的新型双环糖肽类化合物cihanmycins（CHMs）。CHM A (1)的结构通过X-ray单晶衍射确定为双环糖肽，包含肉桂酰基团和两个稀有的D-阿拉伯呋喃糖。研究基于生物信息学分析和异源表达实验，在DSM 45679的基因组中定位了CHM的基因簇，并通过体内基因敲除和体外生化实验证实了3个P450酶的功能，也就是Cih26负责肉桂酰基团的环氧化和羟化，Cih32负责三个氨基酸的羟化，Cih33及其同源蛋白DmlH和EpcH催化分子内C?O苯酚偶联反应形成CHM的双环骨架。为揭示Cih33及其同源蛋白催化C?O苯酚偶联反应的机制，该团队开展了晶体学研究并解析了DmlH和DmlH?7复合物的晶体结构，揭开了分子内C?O苯酚偶联P450酶与大环肽结合模式的神秘面纱。同时，单环底物7的柔性结构使其NMR信号裂分复杂，难以解析结构，而DmlH?7的结构获取提供了通过复合物晶体鉴定小分子结构的案例。底物7与DmlH的辅因子血红素平面之间有一个水分子，可能在苯酚偶联反应的攫氢过程中起到关键作用。为验证这一推测，该研究开展了分子动力学模拟和量子力学/分子力学计算，揭示了DmlH催化分子内苯酚偶联反应由水介导的双自由基机制，提出了水分子在双自由基苯酚偶联反应中的重要作用。此外，基于生信分析，科研人员在数据库中挖掘到81个含有Cih33同源蛋白的肽类基因簇。该团队对这些基因簇的P450酶进行系统发育分析，发现催化分子内苯酚偶联反应的Cih33/DmlH/EpcH和糖肽类抗生素的P450酶均聚集在同一分支，表明该分支中的其他P450酶可能具有相似的功能和机制，而编码这些P450酶的基因簇有望产生新颖的双环肽类化合物。该研究证实了双环糖肽类化合物CHM生物合成中3个P450酶的功能，并利用酶学和计算化学等方法揭示了DmlH催化分子内苯酚偶联反应由水介导的双自由基机制，为探讨P450酶催化的分子内苯酚偶联反应提供了新视角，并为发现和开发更多新颖的双环肽类化合物奠定了研究基础，为抗生素研发奠定了物质基础。研究工作得国家重点研发计划“合成生物学”重点专项、国家自然科学基金重大项目、澳门赌场王宽诚率先人才计划、广东省自然科学基金等的支持。论文链接CHM生物合成中3个P450酶的功能

打印